ملٽي پلڪس ون اسٽيپ RT-qPCR Premix-UNG
ٻلي نمبر: HCB5145A
Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) هڪ ملٽي پلڪس مقداري پي سي آر ڪٽ آهي، جيڪا آر اين اي تي ٺهيل آهي.تجربي جي عمل ۾، ريورس ٽرانسڪرپشن ۽ مقداري پي سي آر ساڳئي ٽيوب ۾ ڪيا ويا، جن تجرباتي آپريشن کي آسان بڻائي ڇڏيو ۽ آلودگي جي خطري کي گھٽائي ڇڏيو.ھن کٽ ۾، پھرين اسٽرينڊ سي ڊي اين اي کي موثر طور تي گرميءَ جي مزاحمتي ريورس ٽرانسڪرپٽيس ۽ مقداري طور تي ھوٽ اسٽارٽ ٽئگ ڊي اين اي پوليمريز ذريعي ٺاھيو ويو.ڪٽ ۾ خاص طور تي اصلاحي ايم پي بفر، اينزائمز ميڪس وغيره شامل آهن. بفر حل اڳ ۾ ئي Mg تي مشتمل آهي2+۽ dNTP.ان کان علاوه، عنصر جيڪي مؤثر طور تي غير مخصوص پي سي آر ايمپليفڪيشن کي روڪي سگھن ٿا ۽ گھڻن qPCR رد عمل جي ايمپليفڪيشن ڪارڪردگي کي بهتر بڻائي سگھندا آھن، جيڪي ايمپليفڪيشن ڪارڪردگي کي يقيني بڻائي سگھندا آھن ۽ گھڻن ايمپليفڪيشن رد عمل کي انجام ڏئي سگھن ٿا.dUTP/UDG سسٽم شامل ڪيو ويو مؤثر طريقي سان ايروسول آلودگي جي خطري کي روڪڻ لاءِ.
اجزاء
1. بفر
2. اينزيم ميڪس
تفصيل
| گرم شروع | تعمير ٿيل گرم شروع |
| معلوم ڪرڻ جو طريقو | پرائمر-تحقيق جي چڪاس |
| پي سي آر جو طريقو | هڪ قدم RT-qPCR |
| پوليمريز | تاڪ ڊي اين اي پوليمريز |
| نموني جو قسم | ڊي اين اي |
اسٽوريج جون حالتون
پيداوار خشڪ برف سان موڪلي وئي آهي ۽ محفوظ ڪري سگهجي ٿو -25 ~ -15 ℃ 1 سال لاءِ.اهو بار بار کان بچڻ گهرجيمنجمد ڪرڻ.اهو الڳ الڳ محفوظ ڪرڻ جي صلاح ڏني آهي.
هدايتون
1.رد عمل سسٽم
| اجزاء | حجم (μL) | آخري ڪنسنٽريشن |
| 2 × ايم پي بفر | 12.5 | 1× |
| انزايم ميڪس | 1 | - |
| پرائمر/پروب ميڪس (2.5 μM) | 3 | 0.3μM |
| سانچو RNA | 1-10 | - |
| RNase مفت H2O | 25 تائين | - |
نوٽس:
استعمال ڪرڻ کان اڳ چڱيءَ طرح ملائڻ جي پڪ ڪريو، پرتشدد کمپن جي ڪري وڌيڪ بلبلن کان پاسو ڪريو.
هڪپرائمر ڪنسنٽريشن: پرائمر ميڪس ملٽيپلڪس پرائمر سميت، صورتحال جي لحاظ کان بهتر پرائمر ڪنسنٽريشن 0.l ۽ 1.0μM جي وچ ۾ ٿي سگھي ٿو.
ب.پروب ڪنسنٽريشن: پروب ميڪس جنهن ۾ ملٽي پلڪس پروب ليبلنگ فرق فلورسنٽ گروپ شامل آهي، صورتحال جي لحاظ کان بهتر پروب ڪنسنٽريشن 0.05 ۽ 0.5μM جي وچ ۾ ٿي سگهي ٿو.
ج.ٽيمپليٽ جي گھٽتائي: qPCR انتهائي حساس آهي ۽ اها سفارش ڪئي وئي آهي ته ٽيمپليٽ کي گهٽايو وڃي.ڪنٽرول Ct قدر 20 ۽ 35 جي وچ ۾ مناسب آهي.
ڊي.سسٽم جي تياري: مھرباني ڪري الٽرا صاف ڪم ڪندڙ ٽيبل ۾ تيار ڪريو، ۽ پائيپٽر ۽ رد عمل واري ٽيوب بغير نيوڪليز ريزيويو؛اهو فلٽر عنصر سان بندوق سر استعمال ڪرڻ جي صلاح ڏني آهي.پار آلودگي ۽ ايروسول آلودگي کان بچاء.
2. اصلاحي سائيڪلنگپروٽوڪول
| سائيڪل قدم | عارضي. | وقت | سائيڪلون |
| ريورس ٽرانسپشن | 50 ℃هڪ | 20 منٽ | 1 |
| شروعاتي- ٺهڻ | 95 ℃ | 5 منٽ | 1 |
| وڌائڻ وارو ردعمل | 95 ℃ | 15 سيڪنڊ |
40-45 |
| 60 ℃ b | 30 سيڪنڊ c |
نوٽس:
هڪريورس ٽرانسڪرپشن: گرمي پد 42 ° C يا 50 ° C کي منتخب ڪري سگھي ٿو.
ب.ايمپليفڪيشن ردعمل: گرمي پد جي ترتيب ڏنل پرائمر جي Tm قدر جي مطابق آهي.
ج.فلورسنس سگنل حاصل ڪرڻ: مھرباني ڪري تجرباتي طريقيڪار کي اوزار جي دستياب جي ضرورتن جي مطابق مقرر ڪريو.
نوٽس
مهرباني ڪري توهان جي صحت ۽ حفاظت کي يقيني بڻائڻ لاءِ ضروري پي پي اي پائڻ، جهڙوڪ ليب ڪوٽ ۽ دستانو.
