الٽرا نيوڪليز جي ايم پي گريڊ
ٻلي نمبر: HC2016A
الٽرا نيوڪليز جي ايم پي گريڊ جو اظهار ڪيو ويو آهي ۽ صاف ڪيو ويو آهي Escherichia coli (E.coli) ۾ جينياتي طور تي انجنيئر ۽ تيار ڪيل GMP ماحول جي تحت.اهو سائنسي تحقيق ۾ سيل سپرنيٽنٽ ۽ سيل ليسيٽ جي ويسڪوسيٽي کي گھٽائي سگھي ٿو، پروٽين جي صفائي جي ڪارڪردگي کي وڌائي ۽ پروٽين جي فنڪشنل تحقيق کي وڌائي سگھي ٿو.پراڊڪٽ ميزبان نيوڪليڪ ايسڊ جي باقين کي پي-گريڊ تائين گھٽائي سگھي ٿي، ايپليڪيشنن جي حياتياتي شين جي ڪارڪردگي ۽ حفاظت کي بهتر بڻائي ٿي، بشمول وائرس صاف ڪرڻ، ويڪسين جي پيداوار، ۽ پروٽين/پوليسڪرائڊ دواسازي جي پيداوار.ان کان علاوه، پراڊڪٽ پڻ لاڳو ڪري سگھجي ٿو انساني پردي جي رت جي مونو نيوڪليئر سيلز (PBMC) جي ڪلمپنگ کي روڪڻ لاء سيل تھراپي ۽ ويڪسين جي ترقي ۾.
UltraNuclease هڪ sterilized reagent جي صورت ۾ مهيا ڪئي وئي آهي، بفر ۾ (20mM Tris-HCL pH 8.0، 2mM MgCl، 20 mM NaCl، 50٪ گليسرين)، بي رنگ، شفاف مائع جي ظاهر سان.هي پراڊڪٽ جي ايم پي پروسيس جي گهرجن جي ذريعي پيدا ڪئي وئي آهي ۽ هڪ مائع فارم ۾ مهيا ڪيل آهي.
اجزاء
UltraNuclease GMP-گريڊ (250 U/μL)
اسٽوريج جون حالتون
پيداوار خشڪ برف سان موڪلي وئي آهي ۽ محفوظ ڪري سگهجي ٿو -25 ℃ ~ -15 ° C ٻن سالن تائين.
جيڪڏهن پراڊڪٽ کوليو ويو آهي ۽ هڪ هفتي کان وڌيڪ 4 ℃ تي محفوظ ڪيو ويو آهي، اسان فلٽرنگ جي صلاح ڏيو ٿاپيداوار microbial آلودگي کي روڪڻ لاء.
وضاحتون
| اظهار ميزبان | Recombinant E. coli الٽرا نيوڪليز جين سان |
| ماليڪيولر وزن | 26.5 kDa |
| soelectric پوائنٽ | 6.85 |
| پاڪائي | ≥99% (SDS-PAGE) |
| اسٽوريج بفر | 20mm Tris-HCL pH 8.0، 2mm MgCl، 20mm NaCl، 50٪ گليسرين |
|
يونٽ جي تعريف | ھڪڙي سرگرمي يونٽ جي تعريف (U) استعمال ٿيل اينزيم جي مقدار آھيتبديل ڪريو ΔA260 جي جذب جي قيمت 1.0 ذريعي 30 منٽن ۾ 2. 625 ايم ايل ۾8.0 جي pH سان 37 ℃ تي رد عمل جو نظام (جي مڪمل هضم جي برابر37 μg سالمن سپرم ڊي اين اي oligonucleotides ۾). |
هدايتون
1. نموني جمع
Adherent سيلز: وچولي کي هٽايو، سيلز کي PBS سان ڌوء، ۽ supernatant کي هٽايو.
معطلي سيلز: سيلز کي سينٽرفيوگريشن ذريعي گڏ ڪريو، سيلز کي PBS سان ڌوئي، 6,000 تي سينٽرفيوج10 منٽ لاء rpm، گولي گڏ ڪريو.
Escherichia coli: بيڪٽيريا گڏ ڪريو سينٽرفيوگريشن ذريعي، هڪ ڀيرو پي بي ايس سان ڌوئي، سينٽريفيوج 8,000 تي5 منٽ لاء rpm، ۽ گولي گڏ ڪريو.
2. نموني علاج
گڏ ڪيل سيل پيليٽس کي ليسس بفر سان ماس(g) جي مقدار (mL) 1:(10-20) جي تناسب سان علاج ڪريو، يا ميڪيڪل يا ڪيميائي طريقن سان برف تي يا ڪمري جي حرارت تي (1 گرام سيل پيليٽس تي مشتمل آهي.
109 سيلز).
3. اينزيما علاج
1-5mM MgCl شامل ڪريو ردعمل سسٽم ۾ ۽ پي ايڇ کي 8-9 تائين ترتيب ڏيو.
250 يونٽن جي تناسب مطابق الٽرا نيوڪليز شامل ڪريو 1 گرام سيل پيليٽس کي هضم ڪرڻ لاءِ، 37 سينٽي گريڊ تي 30 منٽن کان وڌيڪ وقت تائين انڪيوبيٽ ڪريو.مھرباني ڪري "تجويز ڪيل رد عمل جو وقت" فارم ڏانھن چونڊيوعلاج جي مدت.
4. Supernatant جمع
30 منٽن لاءِ 12,000 rpm تي سينٽرفيوج ڪريو ۽ سپرنيٽنٽ گڏ ڪريو.
نوٽ: جيڪڏهن حل تيزابي يا الڪائن واري آهي، يا لوڻ، صابن، يا وڌيڪ مقدار تي مشتمل آهي.denaturants، مهرباني ڪري enzyme dosage وڌايو يا علاج جو وقت وڌايو.
تجويز ڪيل رد عمل جي حالتons
| پيرا ميٽر | بهترين حالت | مؤثر حالت |
| Mg² + ڪنسنٽريشن | 1-5 ايم ايم | 1-10 ايم ايم |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| گرمي پد | 37 ℃ | 0-42 ℃ |
| DTT ڪنسنٽريشن | 0-100 ايم ايم | > 0 ايم ايم |
| Mercaptoethanol ڪنسنٽريشن | 0-100 ايم ايم | > 0 ايم ايم |
| Monovalent Cation Concentration | 0-20 ايم ايم | 0-150 ايم ايم |
| فاسفيٽ لون ڪنسنٽريشن | 0-10 ايم ايم | 0-100 ايم ايم |
تجويز ڪيل رد عمل وقت (37 ℃، 2 mM Mg²+، pH 8.0)
| UltraNuclease رقم (فائنل ڪنسنٽريشن) | رد عمل جو وقت |
| 0.25 يو/ ايم ايل | > 10 ايڇ |
| 2.5 يو/ ايم ايل | > 4 ڪلاڪ |
| 25 يو / ايم ايل | 30 منٽ |
نوٽس:
مهرباني ڪري توهان جي صحت ۽ حفاظت کي يقيني بڻائڻ لاءِ ضروري پي پي اي، جهڙوڪ ليبارٽري ڪوٽ ۽ دستانو پائڻ!
