Rnase Inhibitor (گليسرول مفت)
Murine RNase inhibitor هڪ recombinant murine RNase inhibitor جو اظهار ڪيو ويو آهي ۽ E.coli کان پاڪ آهي.اهو RNase A, B يا C سان 1: 1 جي تناسب ۾ غير covalent بانڊنگ ذريعي جڙي ٿو، ان ڪري ٽن اينزائمز جي سرگرمي کي روڪي ٿو ۽ آر اين اي کي تباهي کان بچائي ٿو.بهرحال، اهو RNase 1، RNase T1، S1 Nuclease، RNase H يا Aspergillus کان RNase جي خلاف اثرائتو ناهي.Murine RNase inhibitor RT-PCR، RT-qPCR ۽ IVT mRNA پاران آزمائشي ڪئي وئي، ۽ مختلف تجارتي ريورس ٽرانسپيسس، ڊي اين اي پوليميريسس ۽ آر اين اي پوليميريسس سان مطابقت هئي.
انساني RNase inhibitors جي مقابلي ۾، murine RNase inhibitor ۾ ٻه cysteines شامل نه هوندا آهن جيڪي آڪسائيڊشن لاءِ انتهائي حساس هوندا آهن جن جي ڪري روڪيندڙ جي غير فعال ٿيڻ جو سبب بڻجندو آهي.انهي کي ڊي ٽي ٽي (1 ايم ايم کان گهٽ) جي گهٽ ڪنسنٽريشن تي مستحڪم بڻائي ٿي.هي خصوصيت ان کي رد عمل ۾ استعمال ڪرڻ لاءِ موزون بڻائي ٿي جتي ڊي ٽي ٽي جي وڏي مقدار رد عمل جي خلاف آهي (مثال طور حقيقي وقت RT-PCR).
Aدرخواست
هي پراڊڪٽ وڏي پيماني تي ڪنهن به تجربي ۾ استعمال ٿي سگهي ٿو جتي RNase مداخلت ممڪن آهي RNA جي تباهي کان بچڻ لاء، جهڙوڪ:
1. فرسٽ اسٽرينڊ سي ڊي اين اي سنٿيسس، RT-PCR، RT-qPCR، وغيره.
2. ان ويٽرو ٽرانسڪرپشن/ترجمي ۾ آر اين اي کي تباهي کان بچايو (مثال طور ويٽرو ۾ وائرل نقل؛
3. آر اين اي جي اڪيلائي ۽ صاف ڪرڻ دوران RNase سرگرمي جي روڪٿام.
اسٽوريج جون حالتون
اسٽور -25～-15℃؛
منجمد ڪرڻ واري چڪر ≤ 5 ڀيرا؛
1 سالن لاء صحيح.
يونٽ جي تعريف
ھڪڙي يونٽ کي RNase Inhibitor جي مقدار جي طور تي بيان ڪيو ويو آھي جيڪو RNase A جي 5 اين جي سرگرمي کي 50٪ تائين روڪڻ لاء گھربل آھي.
ماليڪيولر وزن
RNase Inhibitor (Glycerol-free) ھڪڙو 50 kDa پروٽين آھي.
معيار تي ضابطو
Exonuclease سرگرمي:
1 μg λ-Hind III جي 40 U جي اينزيم جي انڪيوبيشن سان 16 ڪلاڪن تائين ڊي اين اي کي 37°C تي ھضم ڪيو ويو جنهن جي نتيجي ۾ ڊي اين اي جي ڪا به سڃاڻپ نه ٿي سگھي جيڪا جيل اليڪٽرروفورسس پاران طئي ڪئي وئي آھي.
Endonuclease سرگرمي:
1 μg λ DNA سان 16 ڪلاڪن تائين 37°C تي 40 U جي اينزيم جي انڪيوبيشن جي نتيجي ۾ ڊي اين اي جي ڪا به سڃاڻپ نه ٿي سگهي جيڪا جيل اليڪٽرروفورسس پاران طئي ڪئي وئي آهي.
نڪڻ سرگرمي:
1 μg pBR322 سان 16 ڪلاڪن تائين 37 ℃ تي اينزيم جي 40 U جي انڪيوبيشن جي نتيجي ۾ جيل الیکٹروفورسس پاران طئي ٿيل ڊي اين اي جي ڪا به خرابي معلوم نه ٿي سگهي.
RNase سرگرمي:
1.6 μg MS2 RNA سان 1.6 μg MS2 RNA سان 40 U جي انڪيوبيشن 4 ڪلاڪن لاءِ 37 ℃ تي نتيجي ۾ RNA جي ڪا به سڃاڻپ نه ٿي سگھي جيڪا gel electrophoresis پاران طئي ڪئي وئي.
E.ڪولي ڊي اين اي:
TaqMan qPCR پاران 40 يو اينزيم جو پتو لڳايو ويو آهي.E.coli DNA ≤ 0. 1pg/40U آهي.
Nاوٽs
1. اينزائم جي غير فعال ٿيڻ کي روڪڻ لاءِ پرتشدد طريقي سان نه ڇڪيو يا نه ڇڪيو.
2.RNase inhibitor 25℃ کان 55℃ تائين جي گرمي پد تي سرگرم آھي ۽ ≥65℃ تي غير فعال آھي.
3. RNase H، RNase 1، ۽ RNase T1 جي سرگرمي کي روڪيو نه ويو آهي.
4. RNase سرگرمي کي روڪڻ لاءِ پي ايڇ جي حد وسيع آهي (پي ايڇ 5-9 تي فعال)، وڌ ۾ وڌ سرگرمي ڏيکاري ٿي پي ايڇ 7-8 تي.
