ملٽي پلڪس هڪ قدم RT-qPCR پريمڪس
وصف
ٻلي نمبر: HCR5141A
ملٽي پلڪس ون اسٽيپ RT-qPCR پريمڪس هڪ ملٽي پلڪس مقداري PCR کٽ آهي آر اين اي تي ٻڌل ٽيمپليٽ.تجربن ۾، ريورس ٽرانسپشن ۽ مقدار جي پي سي آر ساڳئي رد عمل واري ٽيوب ۾ انجام ڏنو ويو آهي، تجرباتي آپريشن کي آسان ڪرڻ ۽ آلودگي جي خطري کي گھٽائڻ.بفر ۽ اينزيم ميڪس جي منفرد ڊيزائن کي هڪ قدم lyophilized نظام ۾ استعمال ڪري سگهجي ٿو.ڪِٽ استعمال ڪري ٿي گرمي مزاحمتي ريورس ٽرانسڪرپٽيز کي فرسٽ اسٽرينڊ سي ڊي اين اي جي موثر ٺاھڻ لاءِ استعمال ڪري ٿو hotstart Taq DNA Polymerase استعمال ڪري مقداري واڌ لاءِ.ان ۾ اصلاحي ردعمل بفر، اينزائمز ميڪس وغيره شامل آهن، ۽ عنصر جيڪي مؤثر طور تي غير مخصوص پي سي آر ايمپليفڪيشن کي روڪيندا آهن ۽ ڪيترن ئي qPCR رد عمل جي ايمپليفڪيشن ڪارڪردگي کي وڌائيندا آهن، ڪيترن ئي فلورسنس مقداري ايمپليفڪيشن کي چالو ڪرڻ دوران پرائمر جي ايمپليفڪيشن ڪارڪردگي کي يقيني بڻائي.
اجزاء
| نالو |
| 1. ليو-بفر |
| 2. ليو-اينزائم ميڪس |
| 3. ليو محافظ |
ٽرانسپورٽ جي حالتآئن
ج: ليو-بفر ۽ محافظ: -25~-15℃، شيلف زندگي 1 سال آهي.
ب: ليو اينزيم ميڪس، 2-8 ℃، شيلف زندگي 6 مهينا آهي.
آپريشن لاء هدايتون
1. رد عمل جو نظام (مثال طور 25μL وٺو)
| اجزاء | حجم (μL) | آخري ڪنسنٽريشن |
| ليو-بفر | 6 | 1* |
| ليو-اينزائم ميڪس | 1 | - |
| لائيو- حفاظتي | 8 | - |
| پرائمر ميڪس (10μM) | 1 | 0.1-1uM |
| پروب ميڪس (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
| آر اين اي سانچو | 5 | - |
| DEPC H2O | 25 تائين | - |
2. Optimized سائيڪلنگ پروٽوڪول
1) معياري سائيڪلنگ پروٽوڪول
| رد عمل اسٽيج | گرمي پد | وقت | سائيڪل | |
| 1 | ريورس ٽرانسپشن | 50°Ca | 10 منٽ | 1 |
| 2 | شروعاتي تباهي | 95°C | 5 منٽ | 1 |
| 3 | وڌائڻ وارو ردعمل | 95°C | 15 سيڪنڊ | 45 چڪر |
| 60 ڊگري سينٽي گريڊb | 30 سيڪنڊc |
2) فاسٽ سائيڪلنگ پروٽوڪول
|
| رد عمل اسٽيج | گرمي پد | وقت | سائيڪل |
| 1 | ريورس ٽرانسپشن | 50°Ca | 2 منٽ | 1 |
| 2 | شروعاتي تباهي | 95°C | 2 سيڪنڊ | 1 |
| 3 | وڌائڻ وارو ردعمل | 95°C | 1 سيڪنڊ |
45 چڪر |
| 60 ڊگري سينٽي گريڊb | 13 سيڪنڊc |
نوٽ:
a) ريورس نقل: گرمي پد 10-15 منٽن لاءِ 42°C يا 50°C چونڊيو وڃي ٿو.
b) وڌائڻ وارو ردعمل: درجه حرارت ترتيب ڏنل پرائمر جي Tm قدر مطابق ترتيب ڏني وئي آھي.
ج)ٻرندڙ سگنل حصول: مھرباني ڪري تجرباتي طريقيڪار جي ضرورتن مطابق مقرر ڪريواوزار جو دستور.
ٽيڪنيڪل ڄاڻ / وضاحتون
| گرم شروع | تعمير ٿيل گرم شروع |
| معلوم ڪرڻ جو طريقو | پرائمر-تحقيق جي چڪاس |
| پي سي آر جو طريقو | هڪ قدم RT-qPCR |
| نموني جو قسم | آر اين اي |
نوٽس
1. هي پيداوار صرف تحقيق جي استعمال لاء آهي.
2. مھرباني ڪري ضروري پي پي اي پائڻ، جھڙوڪ ليبارٽري ڪوٽ ۽ دستانا، پنھنجي صحت ۽ حفاظت کي يقيني بڻائڻ لاءِ!
