RT-LAMP رنگ ميٽرڪ ماسٽر ميڪس HCB5204A
ھن پراڊڪٽ ۾ ردعمل بفر، RT-Enzymes Mix (Bst DNA polymerase ۽ گرميءَ جي مزاحمتي ريورس ٽرانسڪرپٽ)، لائوفيلائيز پروٽيڪنٽ ۽ ڪروموجنڪ رنگ جا اجزاء شامل آھن.استعمال ڪرڻ لاء، صرف بفر استعمال ڪريو، ردعمل اينزيم ۽ پرائمر ملايا ويا ۽ ٽيمپليٽ ۾ شامل ڪيا ويا.شامل ڪرڻ lyophilized protectant سڌو ٿي سگهي ٿو.اهو هڪ lyophilizer سان ڳنڍيل هو ۽ lyophilized، ۽ صرف پرائمر ۽ ٽيمپليٽ شامل ڪيا ويا جڏهن استعمال ڪيو ويو.هي ڪٽ هڪ تيز، واضح بصري تشخيص فراهم ڪري ٿو، جنهن ۾ منفي رد عمل ڳاڙهي ۾ ظاهر ڪيو ويو آهي ۽ مثبت رد عمل زرد ۾ تبديلي سان اشارو ڪيو ويو آهي.
جزو
| جزو | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| لوپ وچولي امپليڪشن بفر (رنگ سان) | 0.96 ايم ايل | 4.80 ايم ايل × 2 | 9.60 ايم ايل × 10 |
| RT-Enzymes مکس | 270 μL | 2.70 مليل | 2.70 ايم ايل × 10 |
| لائوفيلائيز محافظ | 0.96 ايم ايل × 2 | 9.60 ايم ايل × 2 | 9.60 ايم ايل × 20 |
درخواستون
DNA يا RNA isothermal amplification لاءِ.
اسٽوريج جون حالتون
خشڪ برف سان ٽرانسپورٽ، -25 ~ -15 ℃ تي ذخيرو ٿيل.بار بار منجمد ٿيڻ کان پاسو ڪريو، پيداوار 12 مهينن لاءِ صحيح آهي.
پروٽوڪول
1.ڪمري جي حرارت تي استعمال ٿيڻ واري رد عمل بفر کي ٿڪايو.چڱيءَ طرح ملائڻ لاءِ وورٽيڪس کي مختصر طور تي يا ٽيوب کي ڪيترائي ڀيرا ڦيرايو، پوءِ ٽيوب جي تري تائين مائع گڏ ڪرڻ لاءِ سينٽرفيوج ڪريو.
2.ردعمل سسٽم جي تياري.هي ريجنٽ ٻن ردعمل سسٽم ۾ تيار ٿي سگهي ٿو، مائع ردعمل ميڪس ۽ لائوفيلائيز سسٽم ميڪس.
1) مائع ردعمل ميڪس تيار ڪريو
| جزو | حجم |
| لوپ وچولي امپليڪشن بفر (رنگ سان) | 10 μL |
| RT-Enzymes مکس | 2.8 μL |
| 10 × پرائمر ميڪسa | 5 μL |
| ٽيمپليٽ DNA/RNA b | × μL |
| نيوڪليس کان پاڪ پاڻي | 50 μL تائين |
2) Lyophilization سسٽم ميلاپ
① lyophilized mix تيار ڪريو
| جزو | حجم |
| لوپ وچولي امپليڪشن بفر (رنگ سان) | 10 μL |
| لائوفيلائيز محافظ | 20 μL |
| RT-Enzymes مکس | 2.8 μL |
| نيوڪليس کان پاڪ پاڻي | 50 μL تائين |
② Lyophilization: تيار ڪيل ميڪس کي 50μL سسٽم ۾ لائوفيلائيز ڪيو ويو
③ تيار ڪريو ردعمل مرکب
| جزو | حجم |
| لائوفيل ٿيل مرکب | 1 ٽڪرو |
| 10 × پرائمر ميڪسa | 5 μL |
| ٽيمپليٽ DNA/RNA b | × μL |
| نيوڪليس کان پاڪ پاڻي | 50 μL تائين |
نوٽس:
1) هڪ.10×پرائمر ميڪس: 16 μM FIP/BIP، 2 μM F3/B3، 4 μM لوپ F/B؛
2) ب.DEPC (پاڻيءَ ۾ حل ٿيندڙ) نيوڪليڪ ايسڊ ٽيمپل لاءِ سفارش ڪئي وئي آهي.
1.30-45 منٽ لاءِ 65 ° C تي انڪيوبيٽ ڪريو، جيڪو رنگ جي تبديليءَ جي رد عمل جي وقت مطابق مناسب طور تي وڌائي سگھجي ٿو.
2.ننگي اک جي مطابق، پيلو مثبت هو ۽ ڳاڙهو منفي هو.
نوٽس
1.لوڻ بفر ٽيوب جي تري ۾ ظاهر ٿي سگھي ٿو، ڪمري جي حرارت تي چڱيءَ طرح ملائڻ لاءِ ٽيوب کي مختصر طور تي يا وري ٽيوب کي ڪيترائي ڀيرا ڦيرايو.
2.رد عمل جي گرمي پد 62 ℃ ۽ 68 ℃ جي وچ ۾ پرائمر جي حالت مطابق بهتر ٿي سگهي ٿو.
3.پيڪيج ٿيل ريجنٽ کي ڊگهي وقت تائين هوا جي سامهون نه رکڻ گهرجي.
4.ڳاڙهي ۽ پيلي رنگ جي رد عمل جو دارومدار رد عمل جي نظام جي pH تبديليءَ تي آهي، مهرباني ڪري استعمال نه ڪريو Tris nucleic acid تي مشتمل اسٽوريج حل، ddH استعمال ڪرڻ جي سفارش ڪئي وئي آهي.2اي ذخيرو ٿيل نيوڪلڪ اسيد؛
5.تجربا معياري ٿيڻ گهرجي، بشمول رد عمل سسٽم جي تياري، ليوفيلائيزيشن، ۽ نموني پروسيسنگ ۽ نموني شامل ڪرڻ جي عمل؛
6.آلودگي کان بچڻ لاء، رد عمل سسٽم کي الٽرا صاف بينچ ۾ تيار ڪرڻ جي سفارش ڪئي وئي آهي، ٻي صورت ۾ ڪمري جي فوم هود ۾ ٽيمپليٽس شامل ڪريو غلط مثبت مداخلت کان بچڻ لاء.
