رنس اي
Ribonuclease A(RNaseA) هڪ واحد اسٽرينڊ پوليپيپٽائيڊ آهي جنهن ۾ 4 ڊسلفائيڊ بانڊ شامل آهن جن جو ماليڪيولر وزن اٽڪل 13.7 kDa آهي.RNase Ais هڪ Endoribonuclease آهي جيڪو خاص طور تي سي ۽ يو جي باقيات تي سنگل اسٽرينڊڊ آر اين اي کي خراب ڪري ٿو.خاص طور تي، ڪليوٽ فاسفوڊيسٽر بانڊ کي سڃاڻي ٿو جيڪو نيوڪليوٽائيڊ جي 5'-رائبوس ۽ فاسفيٽ گروپ جي 3'-رائيبوس تي لڳل پيريميڊين نيوڪليوٽائيڊ جي ذريعي ٺهيل آهي، انهي ڪري ته 2,3'-سائڪلڪ فاسفيٽس کي هائڊرولائزڊ ڪيو ويو آهي. نيوڪليو سائڊ فاسفيٽ (مثال طور pG-pG-pC-pA-pG کي RNase A ذريعي صاف ڪيو ويندو آهي pG-pG-pCp ۽ A-PG پيدا ڪرڻ لاءِ).RNase A واحد-stranded RNA کي صاف ڪرڻ ۾ سڀ کان وڌيڪ سرگرم آهي.تجويز ڪيل ڪم ڪنسنٽريشن 1- 100 μG/mL آهي، مختلف ردعمل سسٽم سان مطابقت.گھٽ لوڻ جو ڪنسنٽريشن (0-100 mM NaCl) استعمال ڪري سگھجي ٿو سنگل اسٽرينڊڊ آر اين اي، ڊبل اسٽرينڊڊ آر اين اي، ۽ آر اين اي زنجيرن کي ڪٽڻ لاءِ جيڪو RNA-DNA ھائبرائڊائيزيشن ذريعي ٺاھيو ويو آھي.
جڏهن ته، اعلي لوڻ جي ڪنسنٽريشن تي (≥0.3 M)، RNase A صرف خاص طور تي واحد-stranded RNA کي صاف ڪري ٿو.
RNase A عام طور تي پلاسمڊ ڊي اين اي يا جينومڪ ڊي اين اي جي تياري دوران آر اين اي کي هٽائڻ لاءِ استعمال ڪيو ويندو آهي.ڇا يا نه DNase تياري جي عمل دوران فعال آهي آساني سان رد عمل کي متاثر ڪري سگهي ٿو.پاڻي جي غسل ۾ ابلڻ جو روايتي طريقو DNase سرگرمي کي غير فعال ڪرڻ لاء استعمال ڪري سگھجي ٿو.هي پراڊڪٽ DNase ۽ protease تي مشتمل ناهي، ۽ استعمال کان اڳ گرمي علاج جي ضرورت ناهي.ان کان علاوه، هي پراڊڪٽ ماليڪيولر حياتيات جي تجربن ۾ پڻ استعمال ڪري سگهجي ٿو جهڙوڪ RNase تحفظ جي تجزيي ۽ آر اين اي ترتيب تجزيي.
اسٽوريج حالتون
پيداوار -25 ℃ ~ - 15 ℃ 2 سالن لاء محفوظ ڪيو وڃي.
وضاحتون
| ظاهر | پائوڊر |
| مقدار | 100mg / 1g |
| پيداوار جو قسم | RNase A |
هدايتون
هي RNase A اسٽوريج حل تيار ڪرڻ لاء عام طريقن مان هڪ آهي.اهو پڻ تيار ڪري سگهجي ٿوليبارٽري يا ريفرنس لٽريچر ۾ روايتي طريقن جي مطابق ٻين طريقن سان (جهڙوڪ10 mM Tris-HCl، pH 7.5 يا Tris-NaCl حل ۾ سڌو سنئون)
1. RNase A اسٽوريج حل جي 10 mg/mL تيار ڪرڻ لاءِ 10 mM سوڊيم ايڪٽيٽ (pH 5.2) استعمال ڪريو.
2. گرمي پد 100 ℃ تي 15 منٽ لاء.
3. ڪمري جي گرمي پد تي ٿڌو، 1 M Tris-HCl (pH 7.4) جو 1/10 حجم شامل ڪريو، ان جي پي ايڇ کي 7.4 تي ترتيب ڏيو (لاءِ)مثال طور، شامل ڪريو 500 mL جو 10 mg/mL RNase اسٽوريج حل 1 M Tris-HCl, pH7.4).
4. منجمد اسٽوريج لاءِ -20 ℃ تي ذيلي پيڪيج، جيڪو 2 سالن تائين مستحڪم ٿي سگهي ٿو.
[نوٽ]:
جڏهن غير جانبدار حالتن ۾ RNaseA حل کي ابلايو ويندو، RNase ورن ٺاهي ويندي؛ان کي گهٽ پي ايڇ تي اڇو، ۽ جيڪڏهن ورن آهي، اهو مشاهدو ڪري سگهجي ٿو، جيڪو پروٽين جي تڪليف جي موجودگي جي ڪري ٿي سگهي ٿو.جيڪڏهن اُبلڻ کان پوءِ سليمينٽ ملي ٿي، ته تيز رفتار سينٽرفيوگريشن (13000rpm) ذريعي نجاست کي ختم ڪري سگهجي ٿو، ۽ پوءِ منجمد اسٽوريج لاءِ ذيلي ڀريل.
نوٽس
مهرباني ڪري توهان جي صحت ۽ حفاظت کي يقيني بڻائڻ لاءِ ضروري پي پي اي، جهڙوڪ ليبارٽري ڪوٽ ۽ دستانو پائڻ.
