ملٽي پلڪس qPCR Probe Premix
ٻلي نمبر: HCB5051A
TaqMan ملٽي پلڪس qPCR ماسٽر ميڪس (ڊائي بيسڊ) 2 × حقيقي وقت مقداري پي سي آر ايمپليفڪيشن لاءِ اڳواٽ حل آهي جنهن جي خصوصيت اعليٰ حساسيت ۽ خاصيت آهي، جنهن جو رنگ نيرو آهي، ۽ نموني جي اضافي جو اثر آهي.هي پراڊڪٽ هڪ 2× مڪس پري-مڪسڊ ريجينٽ آهي جيڪو هڪ واحد رد عمل ۾ چڱيءَ طرح چار فلورسنٽ مقداري PCR رد عمل کي قابل بڻائي ٿو.هي پراڊڪٽ شامل آهي جينياتي طور تي تبديل ٿيل اينٽي باڊي جو طريقو گرم شروع ڪرڻ لاءِ Taq اينزائم، وڏي پيماني تي حساسيت ۽ خاصيت کي بهتر بڻائي ٿو.ساڳي ئي وقت، هي پراڊڪٽ تمام گهڻي رد عمل واري بفر کي بهتر بڻائي ڇڏيو آهي، جيڪو رد عمل جي ايمپليفڪيشن ڪارڪردگي کي بهتر ڪري سگهي ٿو ۽ گهٽ ڪنسنٽريشن ٽيمپليٽس جي اثرائتي واڌ کي فروغ ڏئي ٿو.هي پراڊڪٽ جينوٽائپنگ ۽ ملٽي پلڪس مقداري تجزيي لاءِ استعمال ٿي سگهي ٿو.
تفصيل
| گرم شروع | تعمير ٿيل گرم شروع |
| معلوم ڪرڻ جو طريقو | پرائمر-تحقيق جي چڪاس |
| پي سي آر جو طريقو | qPCR |
| پوليمريز | تاڪ ڊي اين اي پوليمريز |
| نموني جو قسم | ڊي اين اي |
اسٽوريج جون حالتون
پيداوار خشڪ برف سان موڪلي وئي آهي ۽ محفوظ ڪري سگهجي ٿو -25 ~ -15 ℃ 2 سال لاءِ.
هدايتون
1. رد عملسسٽم
| اجزاء | حجم (μL) | آخري ڪنسنٽريشن |
| 2× تاقمان ملٽيپلڪس qPCR ماسٽر ميڪس | 12.5 | 1× |
| پرائمر مکس (10 μmol/L) a | × | 0.1 - 0.5 μmol/L |
| تحقيق جو مرکب (10 μmol/L)b | × | 50 - 250 nmol/L |
| Rox حوالو رنگ | 0.5 | 1× |
| ٽيمپليٽ DNA/cDNA | 1-10 | - |
| ڊي ايڇ2O | 25 تائين | - |
نوٽس:استعمال ڪرڻ کان اڳ چڱيءَ طرح ملايو وڃي ته جيئن وڌيڪ بلبلن کي زوردار لڪڻ کان بچڻ لاءِ.
هڪپرائمر ڪنسنٽريشن: پرائمر ميڪس ۾ پرائمر جا گھڻا جوڙا شامل آھن، عام طور تي ھر پرائمر کي 0.2 μmol/L جي آخري ڪنسنٽريشن تي ۽ پڻ 0.1 ۽ 0.5 μmol/L جي وچ ۾ ترتيب ڏئي سگھجي ٿو.
ب.پروب ڪنسنٽريشن: پروب ميڪس ۾ مختلف فلورسنس سگنلز سان گڏ گھڻا پروب شامل آھن، ۽ ھر پروب جي ڪنسنٽريشن کي 50 ۽ 250 nmol/L جي وچ ۾ مخصوص صورتحال جي مطابق ترتيب ڏئي سگھجي ٿو.
1.Rox ڊائي ريفرنس: اهو ريئل ٽائم پي سي آر ايمپليفڪيشن اوزار جهڙوڪ اپلائيڊ بايو سسٽم تي استعمال ڪيو ويندو آهي ته جيئن کوهن جي وچ ۾ پيدا ٿيندڙ فلورسنس سگنل جي غلطي کي درست ڪري سگهجي.ھن پراڊڪٽ ۾ شامل نه آھي Rox رنگ جو حوالو.Cas#10200 سفارش ڪئي وئي آهي جيڪڏهن ضرورت هجي.
2.ٽيمپليٽ جي گھٽتائي: qPCR انتهائي حساس آهي، ۽ ان کي استعمال ڪرڻ لاء ٽيمپليٽ کي گھٽائڻ جي صلاح ڏني وئي آهي.جيڪڏهن ٽيمپليٽ هڪ سي ڊي اين اي اسٽاڪ حل آهي، ٽيمپليٽ جو حجم ڪل مقدار جي 1/10 کان وڌيڪ نه هجڻ گهرجي.
3.رد عمل جو نظام: 25μL، 30μL يا 50 μL سفارش ڪئي وئي آهي انهي کي يقيني بڻائڻ لاءِ ته ٽارگيٽ جين امپليفڪيشن جي اثرائتي ۽ ورجائي.
4.سسٽم جي تياري: مھرباني ڪري سپر صاف بينچ ۾ تيار ڪريو، ۽ نيوڪليز ريزيڊيو کان سواء ٽوٽڪا ۽ رد عمل ٽيوب استعمال ڪريو؛اهو فلٽر ڪارٽريز سان ٽوٽڪا استعمال ڪرڻ جي صلاح ڏني آهي.پار آلودگي ۽ ايروسول آلودگي کان بچاء.
2.رد عمل پروگرام
| سائيڪل قدم | عارضي. | وقت | سائيڪلون |
| شروعاتي- ٺهڻ | 95 ℃ | 5 منٽ | 1 |
| رد ڪرڻ | 95 ℃ | 15 سيڪنڊ | 45 |
| اينيلنگ / توسيع | 60 ℃ | 30 سيڪنڊ |
نوٽس:
1.اينيلنگ / توسيع: درجه حرارت ۽ وقت کي ترتيب ڏنل پرائمر Tm قدر جي مطابق ترتيب ڏئي سگھجي ٿو.
2.فلورسنس سگنل حاصل ڪرڻ: مختلف qPCR ڳولڻ جي آلات لاءِ گهربل فلورسنس سگنل حاصل ڪرڻ جو وقت مختلف آهي، مھرباني ڪري گھٽ ۾ گھٽ وقت جي حد جي مطابق مقرر ڪريو.ڪيترن ئي عام اوزارن جو وقت هن ريت مقرر ڪيو ويو آهي:
20 سيڪنڊ: اپلائيڊ بايو سسٽم 7700، 7900HT، 7500 فاسٽ
31 سيڪنڊ: اپلائيڊ بايو سسٽم 7300
32 سيڪنڊ: اپلائيڊ بايو سسٽم 7500
نوٽس
مهرباني ڪري توهان جي صحت ۽ حفاظت کي يقيني بڻائڻ لاءِ ضروري پي پي اي، جهڙوڪ ليبارٽري ڪوٽ ۽ دستانو پائڻ!
