ٻيهر ٺهڪندڙ Trypsin
Trypsin خاص طور تي C-terminal peptide bonds of lysine ۽ arginine، جيڪي انٽرسيلولر بائنڊنگ پروٽين کي خراب ڪري سگھن ٿا.هائيسن بايوٽيڪ پاران تيار ڪيل ريڪمبنينٽ ٽرپسن جو امينو ايسڊ تسلسل ساڳيو ئي آهي جيڪو پورڪين پينڪرياز مان نڪتل ٽريپسن جو آهي، ۽ ٻيهر ٺهڪندڙ Escherichia coli ايڪسپريشن ذريعي پيدا ٿئي ٿو.اهو ٽرپسن جي روايتي اضافي کي تبديل ڪري سگهي ٿو سيل هضم لاءِ ويڪسينز، اسٽيم سيلز، مدافعتي سيل جي علاج، دوا جي اسڪريننگ، اينٽي باڊيز ۽ ٻين شعبن ۾.Aprotinin، سويابين trypsin inhibitor، وغيره ٽرپسن جي سرگرمي کي واضح طور تي روڪي سگھي ٿو.
Recombinant trypsin ساڳيون خاصيتون آهن جيئن قدرتي طور ڪڍيل trypsin.هي پراڊڪٽ جي ايم پي گريڊ ورڪشاپ ۾ ٺاهيو ويو آهي.خمير، صاف ڪرڻ ۽ آخري اجزاء ۾ ڪنهن به جانور جي اصل خام مال استعمال نه ڪيو ويو آهي.ساڳئي وقت، پيداوار ۽ معيار جي ڪنٽرول جي عملن جي تصديق ڪئي وئي آهي، جنهن جي نتيجي ۾ بيچ جي وچ ۾ هڪ اعلي سطحي استحڪام.
پيداوار جون خاصيتون
| CAS | 9002-07-7 |
| EC | |
| ڪردار | اڇو يا بند اڇو ڪرسٽل طاقت |
| ماليڪيولر وزن | 24kDa |
| Isoelectric پوائنٽ | 8.26 |
| صفائي (RP-HPLC) | β-trypsin≥70.0٪؛α-Trypsin≤20.0% |
| مخصوص سرگرمي | ≥3800.0U/mg پروٽين (BAEE) |
| ٻيهر ٺهڪندڙ trypsin سرگرمي | ≥2500.0U/mg پاور (BAEE) |
| سڃاڻپ | واڱڻائي |
| بهترين پي ايڇ | 8.0 |
| بائيو بارڊن | ≤300CFU/g |
| E. Coli ميزبان سيل پروٽين جي باقيات | ≤0.01% |
| E. ڪوليميزبان سيل ڊي اين اي جي باقيات | ≤10.0000ng/mg |
| Endotoxin مواد (LAL-Test) | ≤20.0EU/mg |
| پروٽين جو مواد | 95.0%±10.0% |
اسٽوريج حالتون
اسٽوريج جي استحڪام: Recombinant trypsin lyophilized طاقت 2-8 ℃ هيٺ ذخيرو ڪيو وڃي.اهو 24 مهينن اندر مستحڪم آهي.1mM HCl يا 50mm HAC سان حل ڪرڻ کان پوء، ان کي -25 ～ - 15 ℃ هيٺ ذخيرو ڪيو وڃي.اهو 10 ڀيرا بار بار منجمد ۽ thawing کان پوء ڪو به سرگرمي نقصان نه آهي.
يونٽ جي تعريف
25℃، pH 7.6، 3.2ml ردعمل حل (1cm روشني جو رستو)، ھڪڙو ٽرپسن يونٽ (U) 0.003 جي واڌ جي طور تي بيان ڪيو ويو آھي جذب جي قيمت ۾ 253nm تي BAEE في منٽ جي اينزيميٽڪ هائڊروليسس ذريعي.
معيار تي ضابطو
سرگرمي: ٽرپسن جي سرگرمي جو تعين ڪرڻ لاءِ فارماڪوپيا آف دي پيپلز ريپبلڪ آف چائنا جلد 4 (2020 ايڊيشن).
.E. ڪولي ميزبان سيل پروٽين بقايا: ايليسا کٽ.دواسازي آف دي پيپلز ريپبلڪ آف چائنا جلد 4 (2020 ايڊيشن) -E. ڪولي ميزبان سيل پروٽين جي رهائش (3412).
.پروٽين جي صفائي: دواسازي آف دي پيپلز ريپبلڪ آف چائنا جلد 4 (2020 ايڊيشن) - HPLC ميٿڊ لاءِ جنرل ضابطا (0512).
. بائيو بارڊن: Pharmacopoeia of the People's Republic of China جلد 4 (2020 ايڊيشن)-جنرل رولز فار اسٽريلٽي ٽيسٽ (1101).•اي ڪوليميزبان سيل ڊي اين اي جي باقياتe: Pharmacopoeia of the People's Republic of China جلد 4 (2020 ايڊيشن) ميزبان سيل ڊي اين اي باقيات (3407).. Endotoxin مواد: Pharmacopoeia of the People's Republic of China جلد 4 (2020 ايڊيشن) - LAL-ٽيسٽ لاءِ جنرل ضابطا (1143).
پيداوار جي هدايت
1.حل جي تياري: COA جي پروٽين جي مواد (پاور جي سرگرمي ۽ پروٽين جي سرگرمي جي حساب سان) جي مطابق مناسب مقدار ۾ trypsin وٺو، ۽ HBSS توازن حل شامل ڪريو (يا سيل جي هضم لاء مناسب ٻيو بفر، جيڪڏهن ضروري هجي ته، EDTA کي آخري ڪنسنٽريشن ۾ شامل ڪريو. 0- 1 ايم ايم، اهو بهتر آهي ته 2 ايم ايم کان وڌيڪ نه هجي).تجويز ڪيل ٽريپسن ڪنسنٽريشن اٽڪل 0. 1-0.3mg/mL آهي (ڪنسنٽريشن مختلف سيلز جي مطابق ترتيب ڏني وئي آهي)، ۽ نرميءَ سان ملايو وڃي ٿو.هن قدم کي ڪمري جي حرارت تي هلائي سگهجي ٿو.
2. ٽرپسن حل کي فلٽر ڪرڻ لاءِ 0.22μm فلٽر استعمال ڪريو ۽ ان کي جراثيم کان پاڪ ڪنٽينر ۾ منتقل ڪريو؛اهو قدم ڪمري جي حرارت تي هلائي سگهجي ٿو.
3. فلٽر ٿيل ٽرپسن محلول سڌو سنئون روز جي ضرورت مطابق استعمال ڪيو وڃي (مثال طور، T25 بوتلن ۾ 1mL شامل ڪرڻ، سيلز کي 37°C تي هضم ڪرڻ)، ۽ مائع کي 1-2 هفتن لاءِ 2-8°C تي محفوظ ڪري سگھجي ٿو. .
4. ڊگھي مدي واري اسٽوريج: جيڪڏهن تيار ڪيل ٻيهر ٺهڪندڙ سيل هضمي حل کي ڊگھي وقت تائين ذخيرو ڪرڻ جي ضرورت آهي، ان کي 12 مهينن تائين -25 - 15 ° C تي مستحڪم طور تي محفوظ ڪري سگهجي ٿو.
پيداوار جو استعمال
سيل لاء ثقافت
• ٽشو بلاڪ هضم، پرائمري سيل حاصل ڪرڻ.
• لنگھندڙ خلين جو ھضم.
• مائڪرو ڪيريئر طريقي سان سيل ڪلچر.
• اسٽيم سيلز کي نرميءَ سان هضم ڪرڻ.
• مدافعتي سيل جو علاج، وغيره.
ٻيهر ملندڙ پروٽين لاء:
.ٻيهر ملندڙ انسولين جي پيداوار.
.پروٽين جي ترتيب، پيپٽائڊ ميپنگ.
.مخصوص پروٽوولوٽڪ پروسيس جهڙوڪ پروٽوميڪس ريسرچ.
اپاءُ
.غير نامياتي لوڻ جي اعلي ڪنسنٽريشن سرگرمي تي هڪ واضح اثر آهي.
.ٻين پروٽين جي شين سان رابطي کان بچڻ.
.توھان جي حفاظت ۽ صحت لاءِ، مھرباني ڪري ليبارٽري ڪوٽ پائڻ ۽ آپريشن لاءِ دستانا
