هڪ قدم فاسٽ RT-qPCR پروب پريمڪس-UNG
ٻلي نمبر: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (For FAST) ھڪ پروب بنياد تي RT-qPCR فاسٽ ڊيٽڪشن کٽ آھي جيڪو سنگل پلڪس يا ملٽي پلڪس مقداري پي سي آر لاءِ موزون آھي آر اين اي کي ٽيمپليٽ طور استعمال ڪري ٿو (جيئن ته آر اين اي وائرس).هي پراڊڪٽ هڪ نئين نسل جي اينٽي باڊي-تبديل ٿيل Taq DNA Polymerase ۽ هڪ قدم وقف ريورس ٽرانسڪرپٽ استعمال ڪري ٿو، تيز ايمپليفڪيشن لاءِ هڪ بهتر بفر سان، جنهن ۾ تيز ايمپليفڪيشن جي رفتار، اعلي ايمپليفڪيشن ڪارڪردگي ۽ خاصيت آهي.اهو ٿورڙي وقت ۾ گهٽ ۽ اعلي ڪنسنٽريشن نمونن جي سنگل پلڪس ۽ ملٽي پلڪس ٻنهي ۾ متوازن واڌ ويجهه جي حمايت ڪري ٿو.
اجزاء
1. 5×RT-qPCR بفر (U+)
2. اينزيم ميڪس (U+)
نوٽس:
هڪ5×RT-qPCR بفر (U+) شامل آھي dNTP ۽ Mg2+;
ب.اينزيم ميڪس (U+) ۾ شامل آهي ريورس ٽرانسڪرپٽ، گرم شروع ٽائيڪ ڊي اين اي پوليمريس، RNase inhibitor ۽ UDG؛
ج.استعمال ڪريو RNase-مفت ٽوٽڪا، اي پي ٽيوب، وغيره.
استعمال ڪرڻ کان اڳ، 5×RT-qPCR بفر (U+) کي چڱي طرح ملايو.جيڪڏهن پگھلڻ کان پوءِ ورن پوي، بفر جي ڪمري جي گرمي پد تي موٽڻ جو انتظار ڪريو، ملايو ۽ حل ڪيو، ۽ پوءِ ان کي عام طرح استعمال ڪريو.
اسٽوريج جون حالتون
پيداوار خشڪ برف سان موڪلي وئي آهي ۽ محفوظ ڪري سگهجي ٿو -25 ~ -15 ℃ 1 سال لاءِ.
هدايتون
1. رد عمل سسٽم
| اجزاء | حجم (20 μL رد عمل) |
| 2 ×RT-qPCR بفر | 4μL |
| اينزيم ميڪس (U+) | 0.8μL |
| پرائمر اڳتي | 0.1~ 1.0μM |
| پرائمر ريورس | 0.1~ 1.0μM |
| TaqMan تحقيق | 0.05~ 0.25μM |
| سانچو | ايڪس μL |
| RNase-مفت پاڻي | 25μL تائين |
نوٽ: رد عمل جو مقدار 10-50μL آهي.
2. سائيڪلنگ پروٽوڪول (Sتندرست)
| سائيڪل قدم | عارضي. | وقت | سائيڪلون |
| ريورس ٽرانسپشن | 55 ℃ | 10 منٽ | 1 |
| شروعاتي ڊينيچريشن | 95 ℃ | 30 سيڪنڊ | 1 |
| رد ڪرڻ | 95 ℃ | 10 سيڪنڊ | 45 |
| اينيلنگ / توسيع | 60 ℃ | 30 سيڪنڊ |
| سائيڪلنگ پروٽوڪول (تيز) سائيڪل قدم |
عارضي. |
وقت |
سائيڪلون |
| ريورس ٽرانسپشن | 55 ℃ | 5 منٽ | 1 |
| شروعاتي ڊينيچريشن | 95 ℃ | 5 ايس | 1 |
| رد ڪرڻ | 95 ℃ | 3 ايس | 43 |
| اينيلنگ / توسيع | 60 ℃ | 10 ايس |
نوٽس:
هڪريورس ٽرانسڪرپشن جو گرمي پد 50 ℃ کان 60 ℃ جي وچ ۾ آهي، گرمي پد کي وڌائڻ ۾ مدد ڪري ٿي پيچيده جوڙجڪ ۽ اعلي CG مواد ٽيمپليٽس؛
ب.پرائمر جي Tm قدر جي بنياد تي بهترين اينيلنگ جي درجه حرارت کي ترتيب ڏيڻ جي ضرورت آهي، ۽ ريئل ٽائيم PCR اوزار جي بنياد تي فلورسنس سگنل گڏ ڪرڻ لاء ننڍو وقت چونڊيو.
نوٽس
مهرباني ڪري توهان جي صحت ۽ حفاظت کي يقيني بڻائڻ لاءِ ضروري پي پي اي، جهڙوڪ ليبارٽري ڪوٽ ۽ دستانو پائڻ!
