2 × پي سي آر ماسٽر ميڪس (ڊائي کان سواء)
PCR ماسٽر ميڪس هڪ قسم جو روايتي PCR پريمڪس ٿيل حل آهي جيڪو استعمال ڪرڻ لاءِ تيار آهي، جنهن ۾ Taq DNA Polymerase، dNTP ميڪس MgCl2 ۽ اصلاحي بفر شامل آهن.ردعمل جي دوران، صرف پرائمر ۽ ٽيمپليٽ کي وڌائڻ لاء شامل ڪري سگھجي ٿو، جيڪو تجربو جي آپريشن جي مرحلن کي تمام آسان بڻائي ٿو.ھن پراڊڪٽ ۾ بھترين اسٽيبلائيزر شامل آھن ۽ 3 مھينن لاءِ 4℃ تي محفوظ ڪري سگھجي ٿو.PCR پراڊڪٽ ۾ 3′-dA پروٽريشن آهي ۽ آساني سان ٽي ویکٹر ۾ ڪلون ڪري سگهجي ٿو.
اسٽوريج جون حالتون
پيداوار -25 ℃ ~ -15 ℃ تي ٻن سالن لاء ذخيرو ڪيو وڃي.
وضاحتون
| وفاداري (بمقابلي) | 1× |
| گرم شروع | No |
| اوورنگ | 3′-A |
| پوليمريز | تاڪ ڊي اين اي پوليمريز |
| رد عمل فارميٽ | سپر ميڪس يا ماسٽر ميڪس |
| رد عمل جي رفتار | معياري |
| پيداوار جو قسم | پي سي آر ماسٽر ميڪس (2×) |
هدايتون
1.رد عمل سسٽم
| اجزاء | ماپ (μL) |
| ٽيمپليٽ ڊي اين اي | مناسب |
| پرائمر 1 (10 μmol/L) | 2 |
| پرائمر 2 (10 μmol/L) | 2 |
| پي سي آر ماسٽر ميڪس | 25 |
| ڊي ايڇ2O | 50 تائين |
2.واڌارو پروٽوڪول
| سائيڪل جا قدم | گرمي پد (°C) | وقت | سائيڪلون |
| اڳواٽ ٺهڻ | 94 ℃ | 5 منٽ | 1 |
| رد ڪرڻ | 94 ℃ | 30 سيڪنڊ | 35 |
| اينيلنگ | 50-60 ℃ | 30 سيڪنڊ | |
| واڌارو | 72 ℃ | 30-60 سيڪنڊ/kb | |
| فائنل توسيع | 72 ℃ | 10 منٽ | 1 |
نوٽس:
1) ٽيمپليٽ استعمال: 50-200 اين جينومڪ ڊي اين اي؛0.1-10 اين جي پلازميڊ ڊي اين اي.
2) ايم جي2+ڪنسنٽريشن: هن پراڊڪٽ ۾ 3 ايم ايم MgCl2 شامل آهي اڪثر PCR رد عمل لاءِ موزون.
3) annealing گرمي پد: مهرباني ڪري پرائمر جي نظرياتي Tm قدر جو حوالو ڏيو.annealing گرمي پد مقرر ڪري سگهجي ٿو 2-5 ℃ پريمر جي نظرياتي قدر کان گهٽ.
4) توسيع جو وقت: ماليڪيولر سڃاڻپ لاءِ، 30 سيڪنڊ/kb سفارش ڪئي وئي آهي.جين ڪلوننگ لاءِ، 60sec/kb سفارش ڪئي وئي آهي.
نوٽس
1.توھان جي حفاظت ۽ صحت لاءِ، مھرباني ڪري آپريشن لاءِ ليبارٽري ڪوٽ ۽ ڊسپوزيبل دستانو پائڻ.
2.صرف تحقيق لاء استعمال ڪريو!
