فاسفيٽس الڪائن (ALP)
وصف
Alkaline Phosphatase هڪ recombinant E. coli strain مان نڪتل آهي جيڪو TAB5 جين کي کڻندو آهي.اينزائم ڊي اين اي ۽ آر اين اي فاسفومونوئسٽرز جي 5′ ۽ 3′ جي پڇاڙيءَ جي dephosphorylation کي ترتيب ڏئي ٿو.انهي سان گڏ، اهو ريبوز کي هائيڊولائيز ڪري ٿو، انهي سان گڏ ڊي آڪسائيريبونوڪلوسائيڊ ٽرافيفاسفٽس (NTPs ۽ dNTPs).TAB5 Alkaline Phosphatase 5´ protruding، 5´ recessed ۽ blunt ends تي ڪم ڪري ٿو.فاسفٽيس ڪيترن ئي ماليڪيولر حياتيات جي ايپليڪيشنن ۾ استعمال ٿي سگهي ٿو، جهڙوڪ ڊي اين اي يا آر اين اي جي فاسفوريل ٿيل سرن کي هٽائڻ لاءِ ڪلوننگ يا پروب اينڊ ليبلنگ.ڪلوننگ تجربن ۾، dephosphorylation لڪيرايل پلاسميڊ ڊي اين اي کي خود-لڳن کان روڪي ٿو.اهو پي سي آر جي رد عمل ۾ غير منظم ٿيل ڊي اين ٽي پيز کي به ختم ڪري سگهي ٿو ته ڊي اين اي ترتيب ڏيڻ لاءِ ٽيمپليٽ تيار ڪري.70 ° C تي 5 منٽن تائين گرم ڪرڻ سان اينزيم مڪمل طور تي ۽ ناقابل واپسي طور تي غير فعال ٿي ويندو آهي، ان ڪري فاسفيٽس کي ligation يا ختم ٿيڻ کان اڳ ختم ڪرڻ غير ضروري آهي.
استعمال
1. Alkaline phosphatase ملائي پروٽينن سان (اينٽي باڊيز، اسٽريپٽاوڊين وغيره) خاص طور تي ٽارگيٽ ماليڪيولن کي سڃاڻي سگھن ٿا، ۽ استعمال ڪري سگھجن ٿا ELISA، WB ۽ هسٽو ڪيميڪل چڪاس ۾؛
2. Alkaline phosphatase استعمال ڪري سگھجي ٿو 5'-ٽرمينل جي ڊي اين اي يا آر اين اي کي ختم ڪرڻ لاءِ پاڻ سان ڳنڍڻ کي روڪڻ لاءِ؛
3. مٿي ڏنل ڊيفاسفوريلڊ ڊي اين اي يا آر اين اي کي ريڊيو-ليبل ٿيل فاسفيٽس (T4 پولي نيوڪليوٽائيڊ ڪائنس ذريعي) سان ليبل ڪري سگهجي ٿو.
ڪيميائي ساخت
تفصيل
ٽيسٽ شيون | وضاحتون |
Enzyme سرگرمي | 5U/μL |
Endonuclease سرگرمي | معلوم نه ٿيو |
Exonuuclease سرگرمي | معلوم نه ٿيو |
نچڻ واري سرگرمي | معلوم نه ٿيو |
RNase سرگرمي | معلوم نه ٿيو |
E.coli DNA | ≤1 ڪاپي/5U |
Endotoxin | LAL-ٽيسٽ، ≤10EU/mg |
پاڪائي | ≥95% |
ٽرانسپورٽ ۽ اسٽوريج
ٽرانسپورٽ:محيط
اسٽوريج:2-8 ° C تي اسٽور
تجويز ڪيل ٻيهر ٽيسٽزندگي:2 سال